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單細胞懸液制備儀——流式細胞樣本制備的好幫手
2025-05-09 14:05:03 來源:上海凈信實業發展有限公司流式細胞術做為一種快速的細胞定量分析技術,能夠同時對單個細胞進行多種特征參數的檢測,如細胞大小、DNA含量、蛋白質表達等,現已成為科研領域中不可或缺的重要工具。
流式檢測能順利進行的硬要求之一是,樣本必須能在鞘液中流動,因此,無論是培養的細胞,還是從各種組織中提取出來的細胞,都需要把待測樣本制備成單細胞懸液!制備欠妥的樣本,不僅會直接影響實驗的準確性和結果的可靠性,一些大的細胞團塊甚至會堵塞液流系統而影響儀器的正常運行。
實驗過程
1、取脾臟
頸椎脫臼法處死小鼠;在解剖臺上固定小鼠,從底端小心剪開小鼠整個腹部皮膚,暴露出小鼠腹膜;剪開小鼠腹膜,暴露出脾臟,摘取,并充分去除上面的脂肪組織;將取下的脾臟剪碎,置于預冷的PBS中浸泡待用
2、制備單細胞
使用凈信單細胞懸液制備儀,設置參數,點擊啟動,程序結束后加入終止液
3、裂解紅細胞
在離心后的細胞懸液中加入ACK紅細胞裂解液,重懸細胞,在室溫裂解5min
4、過濾洗滌
通過過濾網過濾,將過濾后的細胞懸液收集至離心管中,離心5min,去除上清液
5、單細胞計數
顯微鏡觀察細胞,使用染色緩沖液重懸細胞調整細胞濃度,吸取細胞懸液至流式管中,準備染色
結果分析:
小鼠脾臟活率99%,方便后續進行流式分析。
注意事項:
1.組織盡量剪碎,消化效果更好
2.摘取脾臟后,盡可能移除黏連的脂肪組織,提高脾臟細胞的占比
3.建議使用新鮮配制的紅細胞裂解液
4.消化后的細胞應洗滌干凈,否則影響流式效果
單細胞懸液制備儀不僅效率高、溫和,保護細胞活性,還精準可控,適應不同組織類型。高通量設計,提升實驗效率,對于需要處理多個樣本的研究項目,單細胞懸液制備儀的高通量設計可以同時處理多個樣本,大幅縮短實驗時間。選擇合適的儀器,可批量制備單細胞懸液,節約了實驗時間,根據需求選擇儀器中人體、小鼠各個組織、器官對應程序,提高了單細胞懸液制備的活率和得率,使后續實驗進行更加順利。
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