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通道載玻片--新的免疫熒光方法
2016-05-11 14:53:50 來源：
現在分享一種簡便的免疫熒光方法，無需爬片，培養-操作-鏡檢，在一個培養皿/載玻片上完成所有工作！一氣呵成！
使用如圖的培養皿和載玻片，免疫熒光步驟將簡化為：
- 直接細胞培養
- 沖洗玻片/培養皿
- 固定細胞
- 沖洗玻片/培養皿
- 染色
- 沖洗玻片/培養皿
- 凍存液處理細胞
- 直接鏡檢觀察
免去了指甲油封片的傳統免疫熒光方法中的冗長步驟：
- 無需對蓋玻片和載玻片消毒滅菌
- 無需對蓋玻片進行包被
- 無需等細胞爬片
- 無需指甲油封片
之所能如此簡便完成免疫熒光實驗，是因為這些ibidi培養皿和載玻片的底部為特殊處理的材質，絕大多數細胞可以直接貼壁生長，而不需要另外包被。同時，這些耗材的底部薄如蓋玻片，可以直接使用倒置顯微鏡進行觀察，得到高質量的成像，適用于高端顯微鏡比如共聚焦顯微鏡。
成像效果：
下面再分享一種*的免疫熒光方法，不僅更加簡化實驗步驟，而且可以節約試劑和細胞，同時還能得到更出色的成像效果。
如圖的ibidi通道載玻片，簡單快速完成免疫熒光實驗。
步驟：培養-固定-染色-鏡檢，只需在這個載玻片上進行4個步驟，免疫熒光實驗輕松完成~
優點總結：
- 節約細胞和試劑
2.成像效果好
使用通道載玻片時，能在相差顯微鏡下獲得更好的成像效果。因為通道上下都是平坦的，不會因為凹液面的折射現象影響到相差顯微鏡成像。而well式的開放小室的相差成像會受到培養皿蓋和液面的折射現象影響。
3.細胞分布均勻
在通道載玻片中，由于沒有培養皿壁的影響，鋪入細胞后，不需要平時的混勻操作，細胞的分布就非常均勻了。而使用開放小室，有可能在鋪細胞混勻后，細胞還是會聚集在小室的邊緣或中心上。如下圖所示。a 是明場相差成像，b為熒光成像。
免疫熒光本身就是個十分基礎的實驗，如今的科技更是便利了實驗，實驗也發展了科技。
以上方法分享給有需要的，奔跑在科研前沿的童鞋們~更快更省地做好免疫熒光噢！
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